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香蕉视频操逼的溶解和保存
建议先用少量肽来试验最适溶解方法,只有当香蕉视频操逼完全溶解后,才能加入溶液并将之稀释至最终浓度。即先溶解,后加入缓冲液。注意: 总是将香蕉视频操逼加入到适当溶剂中搅拌,而不能采用其它方式。
冻干香蕉视频操逼的溶解
1. 香蕉视频操逼溶解中的主要问题是二级结构的形成。
虽然疏水肽链二级结构的形成更明显,但除了最短的肽链外,该现象发生在几乎所有肽链,与极性无关。因此,溶解香蕉视频操逼的第一个原则是用无菌的蒸馏水或去离子水(如果条件允许则用无氧水)。
香蕉视频操逼溶液可能遇到细菌降解。为避免该现象的发生, 香蕉视频操逼应溶解在无菌的蒸馏水中, 或者用0.45或0.2μm孔径的滤膜过滤除菌。
包含Cys、Met、Trp的香蕉视频操逼特别容易氧化, 因此应该溶于无氧的水中。无氧水可以通过注入惰性气体(氮、氦、氩)减压除气得到。
2. 若香蕉视频操逼不溶于纯水,超声处理有助于打碎颗粒并增加溶解度。注意: 超声处理会引起溶液发热和香蕉视频操逼降解。
3. 若香蕉视频操逼中包含多个碱性氨基酸,使用(1-10%)的乙酸水溶液;对于疏水性非常强的香蕉视频操逼,则使用50%乙酸。
4. 若香蕉视频操逼中含有大量酸性氨基酸,可用氨溶液(1-10%)或乙酸乙基吗啡或重碳酸盐等挥发性的碱性缓冲液溶解。pH值在层析前必须调整。
5. 异丙醇和乙腈能溶解中等大小的肽。若肽要上柱,有机溶剂的量则必须很少,否则将严重影响停留时间。
6. 若香蕉视频操逼因为含有Val、Leu、Met、Phe、Tyr、Ala等芳烃侧链而高度疏水,或为中性肽时, DMF或DMSO等膜变性剂的使用,有助于香蕉视频操逼的溶解。
a. 高浓度膜变性剂通过破坏香蕉视频操逼的二级结构而助溶。
b. 膜变性剂适于香蕉视频操逼分析液的制备, 但可能会对其生物活性的研究工作造成干扰。
c. DMF是最佳变性剂(最高浓度可达30%), 滴加至香蕉视频操逼溶解。
d. 反相层析时, DMF将与洗脱液前峰一起流出, 依注入量的多少, 峰值可能很高。大多数肽能在大量DMF 流出后几分钟内流出, 若肽链很小, 洗脱太早, 香蕉视频操逼的量将降低。