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在一些情况下,某些肽具有很高的疏水性时,不易溶解,可以用少量的DMF或DMSO帮助其溶解,这时推荐将香蕉视频操逼溶解于高浓度,然后用水或缓冲液将其稀释到正常的工作浓度。因为盐会导致疏水性香蕉视频操逼的聚合,所以必须在香蕉视频操逼完全溶解后加入缓冲液进一步稀释。当您遇到这种情况时,请您注意以下几点说明:
a. DMF或DMSO的使用有助于香蕉视频操逼的溶解,这是通过破坏香蕉视频操逼的二级结构而助溶。
b. 这种试剂的使用可能会对其生物活性及后续的研究工作造成干扰,请您在溶解考虑到这个问题。
如果香蕉视频操逼溶解不好该怎么办?
对于使用香蕉视频操逼的研究人员来说,香蕉视频操逼的溶解经常是一个主要的难题。每个氨基酸都有不同的物理特性,所以不同的香蕉视频操逼有着不同的溶解性。通常方法,香蕉视频操逼首次须溶解于蒸馏水,更适合消毒水。如果溶解还是有问题,请尝试如下步骤:声波降解有助于溶解香蕉视频操逼。少量醋酸稀释溶液(10%浓度)有助于一般香蕉视频操逼的溶解,氨水溶液有助于酸性香蕉视频操逼的溶解。香蕉视频操逼还推荐将香蕉视频操逼溶解于高浓度,然后用水或缓冲液将其稀释到正常的工作浓度,因为盐会导致聚合。(所以必须在香蕉视频操逼完全溶解后加入缓冲液。)
是否需要在特殊PH值中溶解香蕉视频操逼?
报告将会指示是否有特殊PH值的要求。 如果有特殊PH值要求,C.O.A报告中会注明。
有些溶解性上写“ACN”,是什么意思?
“ACN”是乙腈,是用来帮助溶解某些肽的。
冻干香蕉视频操逼的溶解
1. 香蕉视频操逼溶解中的主要问题是二级结构的形成。
虽然疏水肽链二级结构的形成更明显,但除了最短的肽链外,该现象发生在几乎所有肽链,与极性无关。因此,溶解香蕉视频操逼的第一个原则是用无菌的蒸馏水或去离子水(如果条件允许则用无氧水)。
香蕉视频操逼溶液可能遇到细菌降解。为避免该现象的发生, 香蕉视频操逼应溶解在无菌的蒸馏水中, 或者用0.45或0.2μm孔径的滤膜过滤除菌。
包含Cys、Met、Trp的香蕉视频操逼特别容易氧化, 因此应该溶于无氧的水中。无氧水可以通过注入惰性气体(氮、氦、氩)减压除气得到。
2. 若香蕉视频操逼不溶于纯水,超声处理有助于打碎颗粒并增加溶解度。注意: 超声处理会引起溶液发热和香蕉视频操逼降解。
3. 若香蕉视频操逼中包含多个碱性氨基酸,使用(1-10%)的乙酸水溶液;对于疏水性非常强的香蕉视频操逼,则使用50%乙酸。
4. 若香蕉视频操逼中含有大量酸性氨基酸,可用氨溶液(1-10%)或乙酸乙基吗啡或重碳酸盐等挥发性的碱性缓冲液溶解。pH值在层析前必须调整。
5. 异丙醇和乙腈能溶解中等大小的肽。若肽要上柱,有机溶剂的量则必须很少,否则将严重影响停留时间。
6. 若香蕉视频操逼因为含有Val、Leu、Met、Phe、Tyr、Ala等芳烃侧链而高度疏水,或为中性肽时, DMF或DMSO等膜变性剂的使用,有助于香蕉视频操逼的溶解。
a. 高浓度膜变性剂通过破坏香蕉视频操逼的二级结构而助溶。
b. 膜变性剂适于香蕉视频操逼分析液的制备, 但可能会对其生物活性的研究工作造成干扰。
c. DMF是最佳变性剂(最高浓度可达30%), 滴加至香蕉视频操逼溶解。
d. 反相层析时, DMF将与洗脱液前峰一起流出, 依注入量的多少, 峰值可能很高。大多数肽能在大量DMF 流出后几分钟内流出, 若肽链很小, 洗脱太早, 香蕉视频操逼的量将降低。
对于一些难溶解于双蒸水或缓冲液的肽常用稀乙酸(30%-50%)或稀氨水(30%左右)分别对于碱性(含Arg , Lys , His)或酸性(含Asp, Glu)香蕉视频操逼的溶解。这些方法不溶的香蕉视频操逼, 需要用少量DMF、DMSO溶解,然后加入适量缓冲液,这些溶剂可能对某些实验有副作用,所以在实验时要加注意。
注:肽链中含有残基Ala,Cys,Ile,Leu,Met,Phe,Gln,Asn和Val将会增加香蕉视频操逼的溶解难度。